聚合酶鏈式反應(yīng)簡稱PCR。PCR是體外酶促合成特異DNA的一種方法,由高溫變性、低溫退火及適溫延伸等幾步反應(yīng)組成一個周期,循環(huán)進行,使目的DNA得以迅速擴增,具有靈敏度高、特異性強、操作簡便、省時等特點。它不僅可用于基因分離、克隆和核酸序列分析等基礎(chǔ)研究,還可用于疾病的診斷或任何有DNA,RNA的地方。
PCR可以被認為是與發(fā)生在細胞內(nèi)的DNA復(fù)制過程相似的技術(shù),其結(jié)果都是以原來的DNA為模板產(chǎn)生新的互補DNA片段。細胞中DNA的復(fù)制是一個非常復(fù)雜的過程。參與復(fù)制的有多種因素。PCR是在試管中進行的DNA復(fù)制反應(yīng),基本原理與細胞內(nèi)DNA復(fù)制相似,但反應(yīng)體系相對較簡單。
基因擴增PCR儀主要用于用于科研及臨床的基因擴增、定性PCR基因擴增、熒光/酶免終點定量DNA基因擴增、基因芯片等其他基因分析應(yīng)用的基因擴增等。除基本功能外還具備停電保護,長時間高低溫處理,低溫培養(yǎng),循環(huán)套循環(huán)等各種增強功能,包括科研、臨床、用戶試劑、進口試劑、定性或定量等各種條件要求的PCR實驗。
基因擴增PCR儀是將PCR技術(shù)的高效擴增與原位雜交的細胞定位結(jié)合起來,用于從細胞內(nèi)靶DNA的定位分析的細胞內(nèi)基因擴增儀,從而在組織細胞原位檢測單拷貝或低拷貝的特定DNA或RNA序列。原位PCR技術(shù)的待檢標本一般先經(jīng)化學固定,以保持組織細胞的良好形態(tài)結(jié)構(gòu)。細胞膜和核膜均具有一定的通透性,當進行PCR擴增時,各種成分,如引物、DNA聚合酶、核苷酸等均可進進細胞內(nèi)或細胞核內(nèi),以固定在細胞內(nèi)或細胞核內(nèi)的RNA或DNA為模板,于原位進行擴增。由于被擴增的DNA片段不同,其退火溫度也不同,通過梯度設(shè)置,可一次性篩選出*的退火溫度。這樣既可節(jié)省試驗時間,提高實驗效率,又能節(jié)約實驗成本。該儀器對于在分子和細胞水平上研究疾病的發(fā)病機理和臨床過程及病理的轉(zhuǎn)變有著重要意義。